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色谱柱的柱效检测及保存方法
发布时间:2020-03-19   点击次数:134次

氨基柱的柱效检测及保存方法

  氨基柱是指以硅胶作为基质载体,键合氨基的色谱柱。氨基柱通常用于分析糖类化合物,所用流动相通常是甲醇、乙腈和缓冲盐溶液,乙腈相对使用较多。

  氨基柱使用时易水解,要注意:

  1.pH值越低越有发生水解的危险,所以应严格控制pH范围;

  2.流动相中水的比例越高越有发生水解的危险;

  所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。

  氨基柱的柱效检测:

  用于判断一个用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。说到柱效检测,来向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。

  流动相:10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0;

  标准溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯;

  检测波长254nm。

  这个方法特别适用于新购氨基柱时即进行检测,如有问题,可及时与氨基柱厂家沟通。也适合柱子在准备放置相当长一段时间之前,进行充分清洗后进行检测作为记录留档。在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。

  氨基柱冲洗正相条件下使用的氨基柱就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱就参照C18的清洗方法。

  氨基柱的保存:

  1.正相使用时,将柱子冲洗干净后,用正己烷-乙腈(99:1)保存。

  2.反相使用时,如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;长期不用时需将甲醇依次用异丙醇、CHCl3置换,后用正己烷保存。

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